[PENGENALAN]
Virus demam berdarah yang disebarkan oleh nyamuk Aedes aegypti dan Aedes albopictus, terbagi berdasarkan iklim subtropis dan tropis dunia. Ada empat serotipe terpisah yang jelas dikenal dengan virus demam berdarah 1,2,3 dan 4. Di dalam anak-anak, infeksi/peradangan sering subklinis atau menyebabkan diri sendiri terserang penyakit demam. Bagaimanapun, jika pasien terkena infeksi/tersebar kedua kalinya dengan suatu serotipe yang berbeda, kemungkinan akan timbul suatu penyakit lebih parah, sindrom goncangan demam berdarah atau demam berdarah. Demam berdarah disebabkan oleh virus dan dapat menyebabkan kematian.
Pada umumnya, hasil diagnosa serological dari suatu infeksi virus demam berdarah yang akut menunjukkan kenaikan sebanyak 4 kali lipat atau kenaikan lebih besar di dalam anti zat darah penyerang kuman virus demam berdarah antara fase kritis dengan fase pemulihan pasien. Test haemagglutination-inhibition mempunyai penetapan kadar serological paling umum digunakan untuk mengetahui hasil diagnosa demam berdarah. Tes yang cepat dan handal untuk primer dan sekunder infeksi demam berdarah sangat penting untuk manajemen pasien. Infeksi Dengue Primer berkaitan dengan demam tinggi, sakit kepala, nyeri otot dan ruam kulit. Tanggap Kebal termasuk antibodi IgM dihasilkan setelah hari ke- 5 dari gejala dan bertahan selama 30-60 hari. IgGs muncul hari ke 14 dan bertahan untuk hidup. Infeksi sekunder sering mengakibatkan demam tinggi dan dalam banyak kasus dengan keluarnya darah dan rusaknya peredaran darah. Infeksi sekunder menunjukkan bahwa kenaikan IgGs terjadi dalam 1-2 hari setelah timbulnya gejala dan menginduksi respon IgM setelah 20 hari infeksi.
[PENGGUNAAN YANG DIHARAPKAN]
Alat tes Demam Berdarah IgG / IgM adalah suatu pengujian untuk penetapan kadar fasa-padat immunochromatographic untuk pendeteksian diferensial dan kwalitatif cepat zat darah IgG dan IgM terhadap virus demam berdarah di dalam serum manusia atau plasma. Test ini dimaksudkan untuk mengetahui hasil diagnosa primer dan infeksi/peradangan demam berdarah sekunder. Test ini hanya memberikan hasil percobaan pada tahap awal. Oleh karena itu, pengasingan virus, pendeteksian antigen di dalam jaringan/tisu-jaringan/tisu yang ditetapkan, diperbaiki, RT-PCR dan serological test seperti haemagglutination-inhibition test, metoda hasil diagnosa alternatif yang lebih spesifik harus digunakan untuk memperoleh penyebab infeksi virus demam berdarah.
[PRINSIP]
Alat test uji Demam Berdarah IgG / IgM digunakan untuk mendeteksi dan membedakan IgG dan IgM zat darah penyerang kuman kepada virus demam berdarah di dalam serum manusia atau plasma. Test ini juga dapat mendeteksi semua 4 serotipe Dengue dengan menggunakan campuran rekombinan protein Dengue.
Alat test uji Demam Berdarah IgG / IgM mempunyai 3 garis yang dilapisi, "G" (Demam Berdarah IgG -garis hasil-), "M" (Demam Berdarah IgM -garis hasil-) dan "C" (Garis kontrol). Ketiga bentuk tersebut digunakan untuk melihat hasil dari pengujian. " Garis Kontrol " digunakan untuk kendali prosedural. Garis kontrol akan muncul jika prosedur ujian dilaksanakan dengan baik dan bahan reaksi ujian dari garis kontrol juga bekerja. Jika alat test uji berwarna ungu di daerah "G" dan "M" maka hasil menunjukkan bahwa ada virus Dengue didalam zat darah penyerang kuman IgG atau IgM. Jika alat test tidak menunjukkan adanya warna berarti zat darah penyerang kuman IgG atau IgM tidak mengandung virus Dengue.
Ketika suatu spesimen ditambahkan dengan baik, IgG atau IgM di dalam contoh spesimen mengikat kepada anti manusia IgG atau IgM zat darah penyerang kuman menghentikan dalam dua bentuk ke seberang selaput ujian. Jika imunoglobulin-imunoglobulin demam berdarah spesifik dari IgG atau IgM hadir di dalam contoh, kompleks emas koloidal yang berisi antigen demam berdarah yang ditangkap oleh batas, IgG atau IgM pasien memberi bentuk yang terlihat warnanya.
2. Bahan-bahan
1) Alat Test ini mengandung antigen IgG (G), antigen IgM (M) dan anti-Dengue IgG (C). Alat test ini juga berisi serangkaian protein virus demam berdarah rekombinan.
2) Pencampur penetapan kadar
3) 5 ul pipet kapiler
4) penyerap debu
3. Peringatan
1) Ikuti cara penggunaannya untuk mendapatkan hasil yang terbaik.
2) Ketika berada di dalam area jangan makan, merokok atau minum pada saat melakukan uji coba.
3) Jangan pergunakan alat test jika kemasan sudah rusak dan lewat dari tanggal kadaluwarsa.
4) Semua bahan reaksi harus diletakkan pada suhu-kamar.
5) Komponen-komponen di dalam alat test ini telah teruji menurut standar mutu. Jangan mencampur komponen dari gen yang berbeda.
6) Bahan pencampur penetapan kadar berisi konsentrasi rendah yaitu azida sodium berfungsi sebagai bahan pengawet. Azida sodium adalah zat beracun dan harus ditangani secara hati-hati. Hindari kontak dengan kulit.
4. Ruang simpan dan stabilitas
Alat test ini harus disimpan pada suhu-kamar ( 1 ~30°C) atau didinginkan tetapi jangan dibekukan. Jauhkan dari cahaya matahari langsung. Jangan digunakan jika melewati tanggal kadaluwarsa.
5. Koleksi Spesimen dan Persiapan
1) Alat test uji Demam Berdarah ini bisa menggunakan serum, plasma atau darah.
2) Pergunakan sarung tangan ketika melakukan percobaan.
3) Jika spesimen-spesimen serum atau plasma tidak ingin diuji dengan segera, mereka harus didinginkan pada 2 ~80C. Untuk jangka penyimpanan lebih lama, bekukan spesimen pada suhu -20°C.
4) Spesimen-spesimen yang berisi percepatan boleh menghasilkan hasil percobaan yang plin-plan. Spesimen seperti itu yang harus diperjelas sebelum menguji kadar logam.
5) Pemakaian yang hemolytic, lipaemic, icteric atau secara hasil bakteri dicemari spesimen harus dihindarkan. Hasil salah boleh terjadi.
6. Prosedur Test
1) Taruh alat test di wadah yang kering.
2) Tambahkan 5 ul dari serum atau plasma yang menggunakan 5 pipet ul atau mikropipet kapiler ke dalam contoh yang bujur sangkar well(s).
3) Tambahkan 3-4 tetesan (sekitar 90-120ul) dari pencampur penetapan kadar untuk mendapatkan hasil yang baik.
4) Interpretasikan hasil percobaan pada 15-20 menit.
IgM Positif
Jika ada warna di garis kendali (C) dan IgM garis (M) maka darah positif terkena penyakit Demam Berdarah.
Jika ada warna di garis kendali (C) dan IgG garis (G) maka zat darah positif terserang kuman IgG. Hal ini menunjukkan adanya infeksi/peradangan demam berdarah yang lampau atau yang sekunder.
Jika ada warna garis kendali (C), IgM (M) dan IgG garis (G) maka zat darah positif terserang kuman IgM dan IgG. Hal ini menunjukkan adanya sifat primer atau awal infeksi/peradangan demam berdarah yang sekunder.
Jika garis control yang terlihat di alat test tidak ada antibody IgG & IgM terdeteksi. Ulangi test dalam 3-5 hari jika terindikasi infeksi demam berdarah.
Jika pada garis kontrol “C” tidak ada yang muncul. Kemungkinan Volume spesimen yang tidak cukup atau salah teknik procedural. Dan ini merupakan pertimbangan yang hampir bisa dipastikan untuk kegagalan garis kontrol. Ulangi test menggunakan suatu alat test yang baru.
1) Hanya digunakan untuk in vitro diagnostik. Bukan untuk penggunan internal.
2) Alat test ini mendeteksi zat darah yang terserang demam berdarah di dalam spesimen dan jangan digunakan sebagai acuan satu-satunya untuk hasil diagnosa dari infeksi virus Dengue.
3) Di dalam awal infeksi/peradangan dan beberapa infeksi sekunder, dapat ditemukan tingkat zat darah penyerang kuman IgM bisa rendah. Beberapa pasien mungkin tidak ditemukan adanya tingkat zat darah penyerang kuman pada saat 7-10 hari setelah infeksi/peradangan. Jika masih terdapat gejala-gejala, test uji harus diulangi kembali setelah 3~1 hari dengan menggunakan spesimen yang pertama dari pasien.
4) Seperti hasil dari semua uji diagnosis, hasil-hasil yang dipertimbangkan harus teruji oleh dokter secara klinis.
5) Jika hasil test negatif, dan gejala klinis tetap ada, lakukan test tambahan dengan menggunakan metode klinis lain yang direkomendasikan. Hasil negatif belum tentu menghilangkan kemungkinan deteksi dini demam berdarah.
9. Nilai Yang Diharapkan
Dengue biasanya dikarakterisasikan dengan kemunculan IgM 3-5 hari setelah infeksi. Yang kedua, dikarakterisasikan kenaikan spesifik IgG 1-2 hari setelah infeksi dan kebanyakan juga diikuti dengan kenaikan IgM.
Alat test Dengue IgG / IgM telah dikomparasikan dengan alat test lainnya. Dan hasilnya berkorelasi antara 2 test ini adalah 99.5 %
10. Karakteristik Kinerja
1) Perbandingan Alat Test Dengue IgG / IgM dengan HI Test
Alat test Dengue IgG / IgM dengan HI Test menunjukkan korelasi yang bagus dengan haemagglutination-inhibition (HI) test.
0 komentar:
Posting Komentar